Метод Сэнгера

Метод Сэнгера — метод секвенирования (определения первичной последовательности нуклеотидов молекулы нуклеиновых кислот) ДНК и РНК.

Метод основан на присоединении к однонитчатой секвенируемой молекуле ДНК прямого или обратного секвенирующего праймера и синтезе de novo молекулы нуклеиновой кислоты с применением, например, дидезоксинуклеозидтрифосфатов (ddNTP). При этом синтезируются молекулы разной длины с определенным дидезоксинуклеотидом на конце. После разделения синтезированных молекул электрофорезом возможно определение первичной последовательности

Метод Сэнгера не имеет таких недостатков, как Метод Эдмана

Литература

• Sanger F., Coulson A.R. A rapid method for determining sequences in DNA by primed syntesis with DNA polymerase, J. Mol. Biol., 1975, v. 94, p. 444—448.
• Sanger F., Niclein S., Coulson A.R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1977, v. 74, p. 5463-5467.